奶粉再曝黃曲霉毒素M1超標，SPE法助您實現快速、低成本檢測
7 月 20 日，廣州市工商局在官網公布了近期對市面上乳制品及含乳食品的抽檢結果。由湖南長沙亞華乳業有限公司生產的南山奶粉問題最為嚴重， 5 個批次的嬰幼兒奶粉均檢出含有黃曲霉毒素 M1 。值得注意的是，知名品牌光明奶油、本土沙灣姜汁撞奶均在不合格之列，愛馨多洋奶粉更是兩月三登“黑榜”。
目前檢測黃曲霉毒素的方法通常為免疫親和層析凈化高效液相色譜法和酶聯免疫吸附法（ ELISA ）這兩種方法。酶聯免疫吸附法（ ELISA ）操作簡單，快速，但靈敏度低且會出現假陽性，需使用免疫親和柱法進行精確定性、定量，而免疫親和柱又存在使用繁瑣、價格昂貴、儲存條件苛刻、保存期短等缺點 。
針對上述問題，迪馬科技最新開發出新型、快速、低成本的 ProElut 固相萃取方法。該方法可實現與免疫親和柱法相當的高精度回收率結果，但使用成本卻大大降低。 ProElut 固相萃取法單個樣品的檢測成本為免疫親和柱法的 1/4 ，酶聯免疫法的 1/2 ，同時 ProElut 固相萃取法簡單易操作、不需要專用的大型設備、對操作人員要求不高，特別適用于各種食品生產企業及檢測機構，將大大降低黃曲霉毒素的檢測成本。
以下為使用 ProElut 固相萃取柱開發的黃曲霉毒素 M 1 的檢測方案，供您參考！
1 適用范圍
適用于牛奶、奶粉、乳酪等乳制品中黃曲霉毒素 M1 的檢測。
2 樣品準備 / 提取
2.1 牛奶、原料乳等液態奶制品
(1) 稱取 5g 樣品，加入 5mL 乙腈， 渦旋混合 1min ；
(2) 再加入 10mL 乙腈，渦旋混合 1 min ， 4000rpm ，離心 5min ；
(3) 取上清液 5mL ，作為上樣液待凈化。
2.2 奶粉、乳酪等固體奶制品
(1) 稱取 2g 樣品，加入 5mL 水， 渦旋混合 2min ，樣品與水充分混勻；
(2) 加入 5mL 乙腈，渦旋混合 1 min ；
(3) 再加入 10mL 乙腈，渦旋混合 1min ， 4000rpm ，離心 5min ；
(4) 取上清液 5mL ，作為上樣液待凈化。
3 SPE 柱凈化 —— ProElut AFT 黃曲霉毒素檢測專用柱 1500mg/12mL （ Cat# 65904 ）
|
(1) 活 化： |
10mL 乙腈，流出液棄去； |
|
(2) 上 樣： |
將上樣液加入柱中，接收流出液； |
|
(3) 洗 脫： |
10mL 乙腈洗脫，收集流出液。合并步驟（ 2 ）、（ 3 ）流出液； |
|
(4) 重新溶解： |
在 40 ℃ 下用減壓蒸餾將流出液濃縮至大約 2mL ，向旋蒸瓶中加入 5mL 無水乙醇，繼續減壓蒸餾近干，用 10% 乙腈水定容至 0.5mL ，供 HPLC 分析。 |
4 分析條件
|
色譜柱： |
Diamonsil C18 （ 2 ）， 250 mm × 4.6 mm ， 5 μm （ Cat# 99603 ） |
|
流 速： |
1.0mL/min |
|
檢測器： * |
熒光檢測器， Ex:365 nm ； Em:435 nm |
|
柱 溫： |
30 ℃ |
|
|
進樣量： |
|
20 μL |
|
流動相： |
乙腈：水 =25 ： 75 |
5 添加回收結果
5.1 牛奶中黃曲霉毒素 M1 添加回收結果
|
分析物 |
添加水平 (μg/kg) |
回收率 /% |
RSD( n *=4)/% |
|
黃曲霉毒素 M1 |
0.4 |
90.13 |
3.42 |
|
黃曲霉毒素 M1 |
2 |
92.61 |
4.59 |
5.2 奶粉中黃曲霉毒素 M1 添加回收結果
|
分析物 |
添加水平 (μg/kg) |
回收率 /% |
RSD( n *=4)/% |
|
黃曲霉毒素 M1 |
1 |
90.33 |
3.75 |
|
黃曲霉毒素 M1 |
5 |
87.61 |
4.16 |
5.3 乳酪中黃曲霉毒素 M1 添加回收結果
|
分析物 |
添加水平 (μg/kg) |
回收率 /% |
RSD( n *=4)/% |
|
黃曲霉毒素 M1 |
1 |
92.92 |
2.75 |
|
黃曲霉毒素 M1 |
5 |
85.16 |
3.94 |
.JPG)
黃曲霉毒素檢測相關產品信息 ( 現貨 ) ：
( 參考 GB 5413.37-2010 乳和乳制品中黃曲霉毒素 M1 的測定， GB/T 5009.23-2006 食品中黃曲霉毒素 B1 、 B2 、 G1 、 G2 的測定 等標準 )
|
貨號 |
名稱 |
規格 |
|
樣品前處理 |
|
65904 |
黃曲霉毒素檢測專用固相萃取柱
ProElut AFT
（可用于黃曲霉毒素總量及黃曲霉毒素 M1 的測定） |
1500mg/12mL, 20/pk |
|
82O-COIAC1005 |
黃曲霉毒素 M1 免疫親和柱 |
3mL, 25/pk |
|
82O-COIAC1001 |
黃曲霉毒素總量 ( B1 、 B2 、 G1 、 G2 )
免疫親和柱 |
1mL, 25/pk |
|
82O-COIAC1004 |
黃曲霉毒素總量 ( B1 、 B2 、 G1 、 G2 )
免疫親和柱 |
3mL, 25/pk |
|
244358 |
12 管防交叉污染真空 SPE 萃取裝置 |
12 位 |
|
4803 |
1,3,6mL 柱管通用連接器 |
15/pk |
|
4806 |
考克 ( 控制流量 ) |
15/pk |
|
99011 |
真空 / 正壓兩用泵，無油 |
1/pk |
|
99013 |
抽濾瓶套裝
( 包括硅橡膠管 2 米 , 2L 抽濾瓶及橡膠塞 ) |
1/pk |
|
37177 |
針頭式過濾器 Nylon |
13mm ,0.22μm 100/pk |
|
37180 |
針頭式過濾器 Nylon |
13mm ,0.45μm 100/pk |
|
標準品 |
|
51-46304-U-1EA |
黃曲霉毒素混標（ B1,B2,G1,G2 ） |
5 × 1mL in Methanol
Aflatoxin B1, 1 μ g/mL
Aflatoxin B2, 0.3 μ g/mL
Aflatoxin G1, 1 μ g/mL
Aflatoxin G2, 0.3 μ g/mL |
|
51-46319-U-1EA |
黃曲霉毒素 M1[6795-23-9] |
1mL, 10 μ g/mL in acetonitrile |
|
51-46323-U-1EA |
黃曲霉毒素 B1[1162-65-8] |
1mL
3 μ g/mL in benzene:acetonitrile (98:2) |
|
51-46324-U-1EA |
黃曲霉毒素 B2[7220-81-7] |
1mL
3 μ g/mL in benzene:acetonitrile (98:2) |
|
51-46325-U-1EA |
黃曲霉毒素 G1[1165-39-5] |
1mL
3 μ g/mL in benzene:acetonitrile (98:2) |
|
51-46326-U-1EA |
黃曲霉毒素 G2[7241-98-7] |
1mL
3 μ g/mL in benzene:acetonitrile (98:2) |
|
色譜柱及保護柱 |
|
99603 |
反相高效液相色譜柱
Diamonsil C18(2) |
250 × 4.6mm , 5μm |
|
6201 |
EasyGuard C18 保護柱 |
10 × 4.0mm 1/pk
2 個柱芯 +1 個柱套 |
|
87003 |
UPLC 專用色譜柱
Endeavorsil C18 |
100 × 2.1mm , 1.8 μm |
|
HPLC 溶劑 Ÿ 緩沖鹽 Ÿ 離子對試劑 |
|
50102 |
甲醇 HPLC 級 |
4L |
|
50101 |
乙腈 HPLC 級 |
4L |
|
50144 |
甲酸 HPLC 級 |
50mL |
|
50122 |
異丙醇 HPLC 級 |
4L |
|
50106 |
丙酮 HPLC 級 |
4L |
|
50115 |
正己烷 HPLC 級 |
4L |
|
50134 |
三氟乙酸 HPLC 級 |
50mL |
|
通用色譜產品 |
|
52401B |
瓶架 / 藍色（現貨） |
50 孔 |
|
52401A |
瓶架 / 白色（現貨） |
50 孔 |
|
5323 |
樣品瓶（棕色 / 螺紋） |
2mL, 100/pk |
|
5325 |
樣品瓶蓋 / 含墊（已經組裝） |
100/pk |
|
H80465 |
HPLC 進樣針 |
25μL |
